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技术专栏
光学显微镜种类及使用技巧

1.普通生物显微镜的一般构造
    光学显微镜的基本结构如图2,都可分为光学系统和机械系统两大部分,只有在光学和机械二系统良好的配合下才能发挥显微镜的性能,因此要正确掌握显微镜的用法,必须了解显微镜的结构和原理。

机械部分——镜座、镜臂、镜筒、物镜转换器、载物台、推进器、粗调(10mm/圈)、微调(0.1mm/圈)
    光学部分——反光镜、聚光镜、光圈、物镜(10×、40×、100×)、目镜(5×10×16×),较好的显微镜还有光源。
    镜座是显微镜的基座,使显微镜能平稳地放置在桌子上。
    载物台是放置标本的地方,通常为方形或圆形。镜台上有压片夹用的固定被检标本,较好的显微镜则有标本移动器,转动螺旋可使标本前后和左右移动。有的标本移动器带有游标尺,可指明标本所在位置。
    镜臂用以支持镜筒,也是移动显微镜时手握的部位。

镜筒是连接目镜和物镜的金属筒。镜筒上端插入目镜,下端与物镜转换器相接。
物镜转换器安装在镜筒的下端,其上装有3-5个不同放大倍数的物镜,可以通过转动物镜转换器物镜。

调解器安装在镜臂基部,是调节物镜与被检标本距离的装置,通过转动粗、细调节螺旋便可清晰地到标本。
    目镜一般由两块透镜组成。上面一块称接目透镜,下面一块称场镜。在两块透镜中间或场镜的下方光阑。在进行显微测量时,接目测微尺便要放在视场光阑上.不同的目镜上刻有5×10×15×20×等字符以表示该目镜的放大倍数。可根据需要选择适当的目镜使用。
    物镜是显微镜中很重要的光学部件,由多块透镜组成。根据物镜的放大倍数和使用方法的不同,分为低倍物镜、高倍物镜和油镜三类,低倍物镜有4×10×20×。高倍物镜有40×45×等。油镜有90×95×100×等。

 

目前,显微镜根据结构和原理不同主要分为光学显微镜和电子显微镜,它们中又分成几种类型。
    光学显微镜有明视野显微镜、暗视野显微镜、相差显微镜、荧光显微镜、偏光显微镜和立体显微镜等。
    明视野显微镜——普通生物显微镜

暗视野显微镜——利用特殊的集光器,不使被照射物体的光线直接射入物镜,我们看到的是检测物体表面散发的散射光而观察到物体,所以实际是在暗视野中见到明亮的物象。这样可以观察比较透明的活的微生物,省去染色等步骤,能比较清楚的观察微生物的形态。
    相差显微镜——人眼能观察物体主要是物体所散发出的光线,光具有波粒二相性。波长对应的是颜色,振幅对应亮度。普通生物显微镜观察物体时的染色就是改变被观察物体的波长。但染色时,通常会破坏微生物内部的结构,如果不染色,它有时无法和它周围环境相区分。我们利用透明物体不能改变波长和振幅,但能改变相位的特性,相差显微镜把光线分解成直射光和衍射光,使之相互干涉,即能区分明暗,观察到物体。
    荧光显微镜一一主要用于微生物内部结构的观察。一般通过荧光染色剂使特殊结构在特殊光源下发光,以便观察。
    倒置显微镜——主要用于观察需要进一步生长的活的微生物或动植物细胞。
    电子显微镜——利用光线波长的变化,主要用于观察微生物内部的结构。

 

几点使用技巧:

1检查看到的是否是标本,只要移动玻片标本,如果物象随着标本移动,就可证明观察到的是否是标本。

2如果在观察标本时,无论如何调整焦距都得不到清晰的图象,试将物镜拿下,重新用二甲苯擦拭后再观察。

3一般情况下,物镜与标本的距离为低倍镜:7.63mm、高倍镜0.50mm、油镜0.098mm

4在调节焦距时,如果显微镜的各个镜头是原配,在低倍镜调节好时,直接转动转换器,在高倍镜和油镜下基本已经达到合适焦距,只要调节微调即可。